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液相色譜儀的日常保養(yǎng)維護及色譜柱使用注意注意事項

2019-06-18

  關(guān)于液相色譜儀不知道你聽說過沒有,如果沒有的話可以跟我們一起來了解一下液相色譜儀的日常保養(yǎng)維護及色譜柱使用注意事項,應(yīng)該能讓你對于它的性能個有一部分的了解。

  1、手動進樣器:

  平時應(yīng)該注意使用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進樣分析狀態(tài)清洗;如果出現(xiàn)漏液現(xiàn)象,原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染,一般要申請維修或更換配件。

  2、排液閥:

  此處不能*密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。

  3、單向閥:

  如遇到泵壓不穩(wěn)或流動相不能抽取,則可能是單向閥出現(xiàn)問題,卸下用異丙醇超聲波清洗,清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中,切記不可與安裝方向倒置超洗!

  4、工作站:

  出現(xiàn)死機可重起計算機;不正常運行時,首先可更換電腦測試其硬件故障;或在本機上重新插拔接口、重新安裝軟件。

  5、過濾器:(液相色譜儀)

  當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時,有可能是此部件被污染, 拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。、

  6、吸濾頭:

  特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。

  7、流動相的抽作要求:

  液相級色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾;

  流動相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)

  8、流通池:

  在色譜峰不正常時會可能是此部件補污染。可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據(jù)說明書進行操作或申請維修)。

  9、泵頭:

  泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請維修(如漏液,或更換柱塞桿及其密封墊等)

  泵壓不穩(wěn):

  1、泵頭有氣泡——流動相脫氣/大流量沖洗泵/用注射器抽取流動動相

  2、單向閥故障——清洗

  若上述操作仍不能解決,可用異丙醇沖洗流動(無色譜柱沖洗,由手動進樣器直接進檢測器),流量為3-4ml/min,沖洗50分鐘左右,然后重新安裝色譜柱,更換流動相平衡,如此再不能解決泵壓波動故障,可申請更換配件。

  10.漏液處理:(液相色譜儀)

  C18柱不能進蛋白樣品、血樣,生物樣品。

  要注意柱子的PH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。

  長時間不用儀器,應(yīng)該將柱子取上用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機相(如甲醇)保存,因為純水易長霉。

  流路堵塞問題:堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查,并清洗。清洗方法:①以民丙醇作溶劑沖洗②放在異丙醇中超聲波清洗③用10%稀硝酸清洗

  11.緩沖鹽的使用:

  流動相含有鹽分時,做完實驗后一定要進行流路沖洗;

  首先用水沖洗,打開排液閥用PURG鍵轉(zhuǎn)換出原有含鹽的流動相,然后關(guān)閉排液閥打開泵沖洗全部流路45分鐘以上,如此更換流動相為水和甲醇混合液沖洗全部流路30分鐘(此步驟一般可省去,根據(jù)實驗而論),zui后更換純甲醇沖洗全部流路45分鐘以上。

  12.泵頭沖洗;

  用備件中的針頭和針管分別用蒸餾水和純甲醇沖洗3-5ml。

  如流動相不含鹽,可對機器定期進行簡單的沖洗維護,根據(jù)實驗多少而定。

  手動進樣器沖洗;

  同樣用備件中的針管和沖洗針頭對手動進樣器的裝載狀態(tài)和進樣狀態(tài)分別進行沖洗3-4ml的蒸餾水,然后再沖洗3-4ml的純甲醇。確保每次做完實驗,所有流路中充滿純甲醇!

液相色譜柱色譜柱使用前注意事項:

  液相色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應(yīng)先用10 %左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。

  ( 2 ) 流動相:

  流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動相的水是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經(jīng)過0.45μm 的濾膜過濾一次則更好,尤其是含鹽的流動相。另外,裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線過濾器等裝置應(yīng)該定期清洗或更換。

  以常規(guī)硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的 ph 值適用范圍是 2.0-8.0 , bds c18 適合于堿性化合物, ph值適用范圍為 2.0-10.0 。當(dāng)必須要在 ph值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時,每次使用結(jié)束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動相互溶的溶劑清洗,并*置換掉原來所使用的流動相。

  ( 3 ) 樣品:

  樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過濾器或樣品預(yù)處理柱( spe)對樣品進行預(yù)處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時,所有的溶劑和樣品應(yīng)嚴格脫水。

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