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1 實驗部分

1．I 儀器和試劑：液相色譜儀 ，51o型輸液泵及 U6K進(jìn)樣器（Waters公 司，美國），SPD-2A型紫外檢測（日本 島津），3O66型筆式記 錄儀（重慶儀表總廠）  色譜柱 ：150哪nx4 6哪n不銹鋼柱填充本室臺成的聚氧乙烯交聯(lián)  氨基丙基固定相（5  ）。尿酸（Slg~ 公司）和肌酐 （Merck公 司）均為生化試劑 ，實驗用水 為二次蒸餾水 ，其它試 劑為分析純。流動相用耐酸玻璃砂漏斗（  ）過濾并脫氣 。

1．2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 肌酐和尿酸標(biāo)準(zhǔn)儲備渡（1 g／L）按文獻(xiàn)方法制備 ，可在冰箱中保存一個月。肌酐和屎酸標(biāo) 準(zhǔn)溶液及混臺標(biāo)準(zhǔn)溶液（1∞ r  L）：取適量體積的相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)儲備液 ，用水稀釋至所需濃度 ，使用前新鮮配制 。

1．3 分析條件 流動相 ：0．ol rad／L磷酸鹽緩沖溶液 10％甲醇，pH=4．81。流速 1 mIJmin。檢測波長 235 ran靈敏度 0．16 Atrrs（輸出電壓 10 mY）。色譜分析溫度為室溫，以溶劑峰測定死時間。

1．4 定性測定方法 采用外標(biāo)法 ，以峰高定量。

2 結(jié)果與討論

2．1 檢潮波長的選擇 在 220 280-皿波長范圍測定肌酐和尿酸的紫外吸收，兩物質(zhì)均在 235舢 有高吸收故確定檢測波長 235 IlIn。

2．2 流動相的選擇 因分析 Ig標(biāo)為尿中肌酐和尿酸 ，所以選擇流動相含 0．01 rad／L磷酸鹽緩沖液，使分析條件較溫和?？疾觳煌?/span> pH的流動相對兩物質(zhì)分離的影響 ，在 pH=4．81附近，肌酐和尿酸分 離度好。流動相中甲醇濃度對分離也有影響，選擇 10％的甲醇含量時，兩物質(zhì)有好的分離度。在所選擇的分析條件下 ，無雜質(zhì)峰干擾肌酐和尿酸的檢測。

2．3 工作 曲線、檢測限及線性范 圍 將不 同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)樣 ，進(jìn)樣體積 10  ，以峰高對進(jìn)樣量 （塢作線性回歸如下 ：肌酐 y：2．29+161．75z，相關(guān)系數(shù) r= 1．0000；屎酸 Y=4．14+172．8 z，相關(guān)系數(shù) r0．9999。用逐級稀釋法，在 0．02AUFS時 ，按信噪 比為 3倍計測得檢測限 ：肌酐，2  L-尿酸 ，3  Lo線性范圍肌酐 ，2～1×1  L；屎酸 ，3～1×1  ／Lo

2．4 回收辜及 精 密度  將 不 同量 的肌 酐 和屎 酸標(biāo) 準(zhǔn)溶 液加 人稀 釋 的尿樣 作色譜 分 析 ，回收率 ：肌酐102．0％ ．RSD=3．00go（n=8）；尿酸，96．27％ ，RSD=1．97％（n：8）。

2．5 樣 品測定 取正常人新鮮屎樣用水稀釋 10倍 ，進(jìn)樣 2  ，對 8份尿樣進(jìn)行分析，每份平行測定 3～5次R蚰 <6％。樣品攫I定結(jié)果：肌酐，0．78—1．77 g／L；尿酸 0．28—0 63 k 樣品測定結(jié)果與文獻(xiàn)報道的正常范圍相符 ，色譜分析時問不超過 6 ndn。